特異性強(qiáng)
免疫學(xué)的基本原理決定了抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性
多重免疫組化技術(shù)(mIHC)近兩年發(fā)展迅速,已經(jīng)展示出強(qiáng)大的臨床轉(zhuǎn)化能力,解決了在同一張切片上進(jìn)行多種生物標(biāo)志物檢測(cè)及共定位的難題。
mIHC在一張組織樣本上復(fù)染多種分子標(biāo)記,將多元信息呈現(xiàn)在同一畫面內(nèi),配合特定軟件進(jìn)行全面分析,原位評(píng)估免疫細(xì)胞表型,獲得各靶標(biāo)數(shù)量、密度、百分比等數(shù)據(jù),探尋組織微環(huán)境中的目標(biāo)分子或不同類群細(xì)胞間的相互關(guān)系。這對(duì)于研究疾病的發(fā)生發(fā)展轉(zhuǎn)移機(jī)制,探討疾病診斷和治療具有重要意義。
Principle
TSA技術(shù)(Tyramide Signal Amplification,酪胺信號(hào)放大)利用辣根過(guò)氧化酶(HRP)對(duì)靶蛋白進(jìn)行高密度原位標(biāo)記,提高檢測(cè)的靈敏度,大幅提高信噪比。TSA信號(hào)不受微波法影響,并能在抗體去除后保留信號(hào),同時(shí)由于共價(jià)鍵結(jié)合方式,熒光探針結(jié)合穩(wěn)定。在微波法處理后,即可進(jìn)行下一輪染色檢測(cè),無(wú)需擔(dān)心上一輪染色中抗體的干擾。因此,TSA技術(shù)可以使用同一種屬來(lái)源的一抗進(jìn)行多色標(biāo)記,每一輪染色換用不同熒光標(biāo)記,對(duì)組織切片樣本多重染色。
Advantages
免疫學(xué)的基本原理決定了抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性
在應(yīng)用免疫組化的起始階段,由于技術(shù)上的限制,只有直接法、間接法等靈敏度不高的技術(shù),當(dāng)時(shí)抗體只能稀釋幾倍至幾十倍;現(xiàn)在由于TSA信號(hào)放大功能,利用少量抗體仍可在細(xì)胞中與抗原結(jié)合,超高靈敏度的抗原抗體反應(yīng)使得多重免疫組化方法越來(lái)越多的應(yīng)用到病理診斷工作中
該技術(shù)通過(guò)抗原抗體反應(yīng)和呈色反應(yīng),可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位,可同時(shí)對(duì)不同抗原在同一組織或細(xì)胞中進(jìn)行定位觀察,這樣就可以進(jìn)行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究,對(duì)病理學(xué)的深入研究具有十分重要的意義
同一組織可選用多種不同組合的生物標(biāo)志物,為臨床研究提供多種選擇方案
Process
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